Wie unterscheidet sich pcr von der DNA-Replikation?

Sowohl PCR als auch in vivo DNA Replikation sind Polymerasekettenreaktionen. Wichtige Unterschiede sind:

1. Maschinenpark : Die DNA-Replikation erfolgt bei Körpertemperatur (37C beim Menschen) mit Hilfe einer komplexen Maschinerie. Helikase wickelt beispielsweise dsDNA, einzelstrangbindendeproteiny Stabilisierung dieser abgewickelten Stränge usw. Bei der PCR-Reaktion werden Temperaturzyklen (mit extremen 70-90C-Werten) verwendet, um eine Denaturierung und Anlagerung der DNA-Stränge zu bewirken.

2. Art der Polymerase : Es gibt viele DNA-Polymerasen in Eukaryoten. Bei der PCR stammen thermostabile DNA-Polymerasen von Bakterien or Archaea verwendet werden (z. B. Taq-Polymerase)

3. Länge der DNA : Die gesamte genomische DNA wird routinemäßig im Körper repliziert. Bei der PCR-Reaktion hat die verwendete Polymerase eine viel kürzere Halbwertszeit und ist nur für viel kleinere DNA-Fragmente wirksam

4. Eigenschaften der verwendeten Polymerase : Hohe Wiedergabetreue, Geschwindigkeit, Korrekturlesen und Reparatur sind wünschenswerte Merkmale, die für die DNA-Replikation erforderlich sind. PCR-Reaktionen verwenden einfachere Polymerasen, die nicht so "funktionsreich" sind. Beispielsweise weist die üblicherweise verwendete Taq-Polymerase keine Korrekturlesefähigkeit auf. Genauere Optionen sind jedoch im Handel erhältlich (AmpliTaqGold, PlatinumTaqPolymerase, Pfu-DNA-Polymerase usw.).