Die Schloss- und Schlüsselhypothese besagt, dass das Substrat wie ein Schloss und ein Schlüssel perfekt in das Enzym passt.

Dies steht im Gegensatz zu der Hypothese der induzierten Anpassung, wonach sich sowohl das Substrat als auch das Enzym ein wenig verformen und eine Form annehmen, die es dem Enzym ermöglicht, das Substrat zu binden.

Da das Substrat an ein spezifisches Enzym bindet, ist diese Hypothese für die substratspezifische Enzyme.